Epreuve de technique d'analyses biochimiques

[biokiram]

EPREUVE DE TECHNIQUE D'ANALYSES BIOCHIMIQUES
setif 2008/2009


QUESTION1 (5 points): on a enregistré les temps de rétention (tr) au cours d'une chromatographie sur gel.des protéines suivantes (aldolase:145000, Lactate déshydrogénase: 135000, Phosphatase alcaline: 80000, Ovalbumine: 45000 et Lactoglobuline: 37100) le débit est de 5 ml/h. les temps de rétention sont respectivement: 10.4, 11.4, 18.4, 26.2 et 28.6 heures.
1- calculer les volumes d'élution (Ve) correspondants à chacune des protéines. (1.25 pts)
2- Quels le nom de cette chromatographie?
3- Déterminer la masse moléculaire de la glucokinase sortie à un temps de rétention tr=21h. (2pts)



QUESTION2 (5 points):L'absorbance d'un mélange de 2 nucléotides différents (N1 et N2) à 260 nm est égale à 0.60 et elle est égale à 0.30 à 280 nm. Connaissant le cœfficient d'absorption molaire (ε) de chaque nucléotide, calculer les concentrations de N1 et N2 dans cette solution (on donne L=1cm).
εN1 à 260nm=15 10³ εN2 à 260nm=12 10³
εN1 à 280nm=2.5 10³ εN2 à 280nm=8 10³



QUESTION3 (5 points): Enumérer les principaux procédés de fractionnement et les différents types de chaque procédé?



QUESTION4 (5 points): L'électrophorèse sur gel de polyacrylamide en présence du SDS et du 2-mercaptoéthanol est argement utilisé pour l'étude des poids moléculaires des sous unités protéiques. Le system utilisé dans ce cas est discontinu.
1- Quels sont les rôles du SDS et du 2-mercaptoéthanol? (2pts)
2- Que signifie le terme système discontinu? (1pt)
3- Quelle est la composition chimique du gel polyacrylamide? (1pt) Citer deux autres gels utilisés en électrophorèse. (1pt)


EPREUVE: BIOCHIMIE
Exercice 1:
Soit un triholosides X, non réducteur, dont tous les oses appartiennent à la série D.
L'action d'une βgalactosidase sur X libère le saccharose et un hexose.
Lorsqu'une mole de X est soumise à l'action de l'acide périodique (HIO4), il y a consommation de 3 moles d' HIO4, production d'une mole d'acide formique et aucune d'aldéhyde formique.
Quel est le nom de X selon la nomenclature officielle et quelle est sa formule selon Haworth. Expliquer.



Exercice 2:
Soit le peptide A: Asp-Ala-Glu-Ser-Lys et le peptide B: Asp-Ala-Glu-Ser
a- Quelle enzyme permet d'obtenir B à partir de A
b- A pH=1, quelle est la charge nette de A et quelle est celle de B justifier
c- Le mélange des 2 peptides est soumis à une électronique à pH=7. Indiquer par un schéma à la fin de l'expérience la position des 2 peptides. Justifier le résultat.



Exercice 3:
Une préparation d'enzyme renferme 20 mg de protéine par ml. On sait que l'enzyme a pour son substrat une Km=3 10‾ۤ4M.
En présence d'une concentration 3 10‾ۤ4M de substrat, la transformation du substrat est à raison de
1- A quelle concentration de substrat devra-t-on opérer pour mesure l'activité spécifique de cette préparation d'enzyme,
2- Calculer l'activité spécifique de cette préparation.



Exercice 4:
La biosynthèse de l'acide palmitique est cytoplasmique, consomme 8 acétylCoA et utilise le pouvoir réducteur de 14 NADPH,H+
a- Quelle est l'origine de l'acétylCoA servant à cette synthèse
b- Comment l'acétylCoA formé au niveau de la mitochondrie parvient au niveau du cytoplasme
c- Quelle est l'origine du NADPH,H+ servant à cette synthèse(décrire les réactions biochimiques)