يھدف التمرين كذلك لتحديد شحنة الببتیدات الناتجة من إماھة ببتید آخر أطول باستعمال
إنزيمات متخصصة.
His-Lys-Pro-Arg-Gly-Glu الببتید الأصلي يتكون من
عند الإماھة بواسطة إنزيم تربسین ينتج 3ببتیدات ثنائیة ھي :
. Gly-Glu وPro-Arg وHis-Lys
1تعتمد على عدد الأحماض الأمینیة القاعدية التي يمكنھا = pH شحنة الببتیدات عند
اكتساب شحنتین موجبتین واحدة في الطرف والأخرى في الجذر.
الببتید الثنائي الأول تكون شحنته =+ 3لأنه يضم حمضین أمینیین قاعديین.
الببتید الثنائي الثاني تكون شحنته =+ 2لأن يضم حمضیین أمینیین قاعديین
أما الببتید الثانئي الثالث فتكون شحنته = + 1لأنه لی س له أحخماض أمینیة قاعدية لی س
. NH له شحنات موجبة في الجذور ماھدا الشحنة الطرفیة في مجموعة + 3
1يسمح بفصلھا لأنھا تتجه بسرعات مختلفة نحو = pH لكن pH يمكن اختیار عدة قیم من
القطب السالب وأسرعھا ھو الببتید الأول متبوع باببتید الثاني ثم الثالث نظرا لاختلاف قوة
الشحنة.
للببتید الثاني الذي يبقى في الوسط بینما يتجه pHi يعادل pH يمكن كذلك استعمال
الببتیدان الآخران نحو القطب السالب أو الموجب .